CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN

INTRODUÇÃO

Através desta coloração, podemos visualizar as micobactérias, que possuem na sua parede celular uma grande concentração de lipídeos, devido à presença de ceras e ácidos graxos (ácidos micólicos), o que dificulta a sua visualização através das colorações tradicionais.

UTILIZAÇÃO

1) Diagnóstico bacterioscópico de micobactérias

1.1) Colheita do material clínico:

- Tuberculose: escarro; urina; leite; biópsia (de acordo com a localização).

OBS: O escarro deve ser colhido pela manhã por causa do grande acúmulo, e deve conter o mínimo de saliva possível. Devem ser colhidas três amostras por paciente, em recipiente descartável.

- Hanseníase: raspado de lesão; secreção nasal; gota de sangue do lóbulo da orelha.

1.1) Aplicação:

- Busca de casos (início rápido da quimioterapia)

- Eficiência da quimioterapia

OBS: Este método de coloração possui baixa sensibilidade (mínimo de 10 bac/ml) e grande especificidade.

Para veterinária:

Mycobacterium bovis – Tuberculose bovina. Também pode ser transmitida ao homem, através do leite não pasteurizado.

Patogenia:

Bacilos ingeridos → mucosa da orofaringe e trato digestivo → nódulos mesentéricos → outros tecidos.

EXECUÇÃO

A coloração de Ziehl-Neelsen é realizada utilizando os seguintes métodos:

a) lâmina fixada pelo calor;

b) cobrir o esfregaço com fucsina fenicada;

c) aquecer em chama até emitir vapores. A partir disto, iniciar a contagem de cinco minutos;

d) lavar a lâmina em água, suavemente;

e) colocar álcool-ácido clorídrico, até que não se desprenda mais corante (cerca de dois minutos);

f) lavar a lâmina com água;

g) cobrir o esfregaço com azul-de-metileno (durante trinta segundos);

h) lavar a lâmina com água;

i) deixar secar e observar ao microscópio com a objetiva de imersão.

RESULTADOS

Bactérias álcool ácido resistentes (BAAR): vermelho
Bactérias não-álcool ácido resistentes (BNAAR): azul

Bactérias não-álcool ácido resistentes (BNAAR): azul

Soluções em ordem de aplicação	BAAR	BNAAR
Fucsina de Ziehl	Bactérias coradas em vermelho	Bactérias coradas em vermelho
Álcool-ácido clorídrico	A fucsina se fixa nos lipídeos complexos e não abandona a célula, que permanece vermelha	A fucsina não se fixa nos componentes da parede celular e abandona a célula, que permanece sem corante em seu interior
Azul-de-metileno	A célula não é afetada e permanece vermelha	A célula adquire o corante, tornando-se azul