COLORAÇÃO DE GRAM

Método de Gram

Fundamento ou princípio:    O  cristal  violeta  e  o  lugol  penetram   tanto  nas GRAM  positivas  como  nas  GRAM  negativas, formando  um  complexo  roxo (iodo-para-rosanilina) .  O  tratamento  com  álcool - acetona é a  etapa  diferencial .  O  álcool- acetona não retira  o  complexo ROXO das  Gram  positivas  e extrai das Gram  negativas  descorando-as.   O tratamento  com  fucsina   não  cora  as  bactérias  Gram  positivas

e  as  Gram  negativas  que  perderam o iodo- para- rosanilina  aparecem  em  VERMELHO. 

                                                 TÉCNICA DE GRAM

1.    Cobrir o esfregaço com CRISTAL VIOLETA (VIOLETA DE GENCIANA)

                                             1 MINUTO

2.    Verter o excesso na pia. Cobrir com LUGOL. 1 minuto

3.    Lavar na pia. Descorar com álcool- acetona.

4.    Lavar na pia. Cobrir com FUCSINA DE GRAM ou safranina. 30 segundos

5.    Lavar. Secar. Examinar com objetiva de 100x. Colocar 1 gota de óleo.

Resultados:

Avaliar MORFOLOGIA CELULAR E ARRANJO

Avaliar a resposta ao método de Gram:

Gram positivas = roxas

Gram negativa= vermelhas ou rosa.